如何正確操作人γ干擾素ELISA試劑盒?

　　如何正確操作人γ干擾素ELISA試劑盒?

　　人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒的正確操作流程如下，結(jié)合了不同來源的可靠信息：

　　實驗前準備

　　試劑平衡?：將試劑盒從冰箱取出，在室溫下平衡20-30分鐘，使試劑溫度與實驗室環(huán)境一致?。

　　樣本處理?：避免使用溶血樣本，因血紅蛋白可能干擾HRP標記的ELISA檢測，導致假陽性?。血清/血漿樣本需離心去除雜質(zhì)，細胞上清需過濾。

　　標準品稀釋?：按說明書梯度稀釋標準品(如1000 pg/mL至15.6 pg/mL)，第8孔為空白對照。

　　操作步驟

　　加樣?：

　　每孔加入100μL標準品或待測樣本，避免氣泡和孔壁污染?。

　　加樣順序需一致，減少時間差誤差?。

　　孵育?：

　　37℃孵育90分鐘(抗原-抗體結(jié)合)。

　　洗滌3次，每次浸泡30秒，拍干孔內(nèi)液體?。

　　檢測抗體與顯色?：

　　加入HRP標記抗體，37℃孵育60分鐘。

　　洗滌后加入TMB底物，避光孵育10-20分鐘?。

　　終止與讀數(shù)?：

　　每孔加入50μL終止液，立即用酶標儀讀取450nm吸光度?。

　　注意事項

　　試劑保存?：未使用板條需密封防潮，不同批號試劑勿混用。

　　安全防護?：避免接觸終止液和底物，操作時佩戴手套。

　　數(shù)據(jù)準確性?：每次實驗需做標準曲線，樣本建議復孔檢測。

　　注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。

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