在實驗室中，選擇合適的PCR板是確保實驗成功的關(guān)鍵

　　在實驗室中，選擇合適的PCR板是確保實驗成功的關(guān)鍵

　　PCR板的選擇會對實驗結(jié)果產(chǎn)生重要影響。在實驗準備過程中，PCR板雖然常被忽視，但其重要性不亞于試劑和儀器設(shè)備，直接關(guān)系到實驗的成敗。在進行PCR實驗前，請務(wù)必重點關(guān)注以下五個核心問題。

　　購買PCR板時需重點考量以下五大核心因素，確保實驗準確性和效率：

　　一、材料純度與生物兼容性

　　二、熱傳導性能

　　三、光學特性適配

　　四、結(jié)構(gòu)設(shè)計與密封性

　　五、規(guī)格匹配與標識系統(tǒng)

　　注：特殊實驗場景(如機器人操作)需額外驗證邊框強度，推薦聚碳酸酯加強型96孔板。

　　1 選擇合適高度的PCR板

　　當您從PCR儀中取出反應(yīng)板時，是否曾發(fā)現(xiàn)某些孔位未加樣、密封膜出現(xiàn)冷凝水珠，或是孔壁變形導致中部隆起?這些異?，F(xiàn)象往往源于使用了與儀器不匹配的PCR板高度規(guī)格。

　　PCR儀或?qū)崟r熒光定量PCR儀的熱蓋組件含有加熱壓板裝置，當熱蓋閉合時，該裝置會對PCR板施加特定壓力。若使用高度過大的反應(yīng)板，會導致壓力超標，在熱循環(huán)過程中造成孔壁受壓變形;反之，若在適配高型板的儀器中使用低型板，則會導致壓力不足，進而可能引起樣本冷凝或蒸發(fā)?？烧{(diào)節(jié)蓋板的儀器適配高、低兩種規(guī)格的板。此類儀器的常見識別特征為配有用于緊固或松開蓋板的調(diào)節(jié)旋鈕。部分儀器可自動檢測微孔板高度并自行調(diào)節(jié)，這種設(shè)計能靈活選用適合實驗應(yīng)用的微孔板。而固定高度蓋板的儀器則必須搭配特定尺寸的微孔板使用。準確識別儀器的蓋板與微孔板規(guī)格參數(shù)，可有效避免密封方式不當導致的孔板壓裂問題。

　　02 選擇合適的裙邊

　　PCR板的裙邊是指板體外圍的框架結(jié)構(gòu)，其主要功能是增強反應(yīng)板剛性，并為自動化機械臂提供平整的抓持面。根據(jù)裙邊設(shè)計差異，PCR板可分為三種類型：

　　無裙邊

　　半裙邊

　　全裙邊

　　半裙邊

　　• 垂直延伸結(jié)構(gòu)約為孔深的一半

　　• 提供適中的結(jié)構(gòu)支撐

　　全裙邊

　　• 垂直結(jié)構(gòu)延伸至孔板底部

　　• 提供最大機械穩(wěn)定性

　　• 便于移液監(jiān)控 - 使用者可通過孔板底部、側(cè)面或頂部直接觀察樣本體積透明孔采用未添加染料的聚丙烯材料制成，因而具有半透明特性。

　　主要優(yōu)勢：

　　• 直觀識別加樣失誤 - 可清晰判別漏加孔或孔間體積差異。主要缺陷在于存在熒光信號穿透風險：

　　• 當某孔的熒光信號滲漏至相鄰孔時，會導致鄰孔檢測結(jié)果假性偏高。

　　• 若高熒光信號樣本與低靶標濃度樣本相鄰時尤為嚴重，信號穿透將人為提升低濃度孔的檢測值。

　　無裙邊

　　• 框架僅延伸至孔板邊緣

　　• 不具備垂直延伸結(jié)構(gòu)

　　• 光信號優(yōu)化機制：不透明孔壁有效阻隔側(cè)向光散射，顯著提升信噪比白色孔采用添加白色染料的聚丙烯樹脂制成，形成不透明孔結(jié)構(gòu)。

　　主要優(yōu)勢：

　　• 實驗敏感性保障：對低濃度樣本的信號擴增與檢測具有關(guān)鍵性提升。

　　• 抗干擾性能：消除相鄰孔間熒光穿透風險。主要缺陷

　　• 樣本可視性受限 - 僅能通過垂直俯視觀察孔內(nèi)樣本存在與否及液量情況。

　　• 需依賴惰性染料標記(提升樣本可視性)。

　　4 是否需要硬框

　　容易扭曲變形的PCR板不僅操作困難——還可能影響PCR反應(yīng)效率。若PCR板無法平放在熱循環(huán)儀模塊上，各孔位可能與模塊接觸不均，導致樣品受熱不均勻。更嚴重的是，未能正確就位的PCR板在經(jīng)歷升降溫循環(huán)時可能發(fā)生扭曲變形，致使管蓋或光學密封膜移位，造成樣品蒸發(fā)。當然，易變形的PCR板也無法兼容自動化機械臂操作。

　　5 選擇信任的供應(yīng)商

　　為了避免可干擾DNA擴增的污染，PCR/qPCR塑料耗材應(yīng)不含核酸酶和DNA的污染。盡管如高壓和輻射等滅菌方法可去除細菌和DNA酶，但這些方法并不能去除灰塵和DNA殘留。殘留的灰塵客戶可能會抑制PCR 而片段化的DNA依然可作為模板從而產(chǎn)生非特異性的擴增。

　　天津天正信達供應(yīng)：RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實驗耗材，我司擁有一支覆蓋生物化學、分子生物學、免疫學等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實驗技術(shù)平臺，主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機、全波長酶標儀、高速落地離心機和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。